Différence entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie | Hybridation in situ vs immunohistochimie

Différence clé - Hybridation in situ vs immunohistochimie

Le diagnostic de cancer et de maladies infectieuses est une tendance populaire où de nouvelles techniques basées sur la protéomique et la génomique sont utilisées dans le but d'identifier des tumeurs infectieuses les cellules, sa prolifération et les sites de développement cellulaire et d'analyser les bases génétiques de la plupart des maladies transmissibles et non transmissibles. Cela se traduira par un traitement médicamenteux précis et la conception et le développement de thérapies personnalisées pour les maladies. L'hybridation in situ (ISH) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux techniques largement utilisées en biologie du cancer et la principale différence entre l'hybridation in situ et l'immunochimie réside dans les molécules utilisées dans la procédure d'analyse. Dans l'ISH, les sondes d'acides nucléiques sont utilisées dans l'analyse alors que dans l'IHC, les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour les déterminations diagnostiques.

TABLE DES MATIÈRES

1. Vue d'ensemble et différence clé

2. Qu'est-ce que l'hybridation in situ

3. Qu'est-ce que l'immunohistochimie

4. Similitudes entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie

5. Comparaison côte à côte - Hybridation in situ vs immunohistochimie sous forme tabulaire

6. Résumé

Qu'est-ce que l'hybridation in situ (ISH)?

L'hybridation in situ est une technique d'hybridation d'acide nucléique qui est directement réalisée sur une partie ou une section de tissu, dans tout le tissu ou dans les cellules. La technique dépend de la théorie de l'appariement de bases complémentaires de Watson Crick, ce qui donne des hybrides ADN-ADN ou des hybrides ADN-ARN qui peuvent détecter des gènes mutés ou identifier le gène d'intérêt requis. Les séquences d'ADN simple brin, les séquences d'ADN double brin, les séquences d'ARN simple brin ou les séquences d'oligonucléotides synthétiques sont utilisées comme sondes au cours de la technique d'hybridation et marquées avec un phosphore radioactif à son extrémité 5 '. Il existe différents types de techniques ISH disponibles en fonction du type de sonde utilisé et du type de technique de visualisation suivie.

Figure 01: Hybridation in situ fluorescente

Il existe de nombreuses applications de l'ISH, principalement dans le diagnostic moléculaire des maladies infectieuses afin d'identifier la présence d'agents pathogènes et de confirmer le pathogène par le biais de diagnostics moléculaires.Il est également utilisé dans les domaines de la biologie du développement, du caryotype et de l'analyse phylogénétique et de la cartographie physique des chromosomes.

Qu'est-ce que l'immunohistochimie (IHC)?

Dans la technique de l'IHC, la molécule principale analysée est l'antigène. Pendant l'IHC, des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes lors de l'infection ou de l'état de prolifération des cellules malignes. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps et des marqueurs enzymatiques sont utilisés pour cette technique; Une telle application est ELISA (dosage immuno-enzymatique). Les marqueurs peuvent également être des anticorps marqués par fluorescence ou des anticorps marqués par radio.

Figure 02: Immunohistochimie

IHC est largement utilisé pour la détection des cellules cancéreuses. Les procédures de diagnostic ciblent les antigènes présents sur les cellules tumorales pour identifier et caractériser la tumeur. La même procédure est incorporée pour diagnostiquer les agents infectieux. Des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont également utilisés pour analyser différents produits géniques en permettant la réaction de liaison anticorps-antigène entre la protéine désirée et l'anticorps synthétique administré.

Quelles sont les similitudes entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie?

ISH et IHC sont des réactions hautement spécifiques.

• Les deux techniques sont très précises.
• Les deux techniques peuvent être utilisées dans le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses.
• Ces techniques sont réalisées dans des environnements stériles in vitro.
• Les deux sont des techniques rapides qui fournissent des résultats reproductibles.
• ISH et IHC utilisent des méthodes de détection telles que le marquage radio et les techniques de fluorescence.
• Quelle est la différence entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie?

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Hybridation in situ vs immunohistochimie

L'ISH est une technique d'hybridation d'acide nucléique directement réalisée sur une portion ou une section de tissu ou sur tout le tissu.
L'IHC est une technique dans laquelle des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes, qui sont des marqueurs protéiques spéciaux placés sur les surfaces cellulaires.	Type de Bio Molécules Analysé
ISH analyse les acides nucléiques.
IHC analyse les protéines-antigènes.	Base de la réaction biochimique
Le couplage complémentaire de base entre ADN-ADN ou ADN-ARN se produit dans cette technique.
Les interactions antigène-anticorps sont impliquées dans l'immunohistochimie.	Méthodes de détection enzymatique
Les méthodes de détection enzymatique ne peuvent pas être utilisées dans ISH.
Les méthodes de détection liées aux enzymes peuvent être utilisées dans IHC.	Résumé - L'hybridation in situ vs l'immunohistochimie

Les diagnostics moléculaires sont des méthodes rapides et confirmatoires qui peuvent être utilisées pour identifier une maladie non transmissible comme le cancer ou une maladie transmissible telle que le VIH ou la tuberculose basée sur les marqueurs moléculaires présents sur les cellules qui conduisent à la manifestation de la maladie. Les marqueurs moléculaires peuvent être présents sous la forme de protéines exprimées ou au niveau génétique, sur la base desquelles différentes techniques nouvelles sont introduites pour augmenter l'efficacité et sont moins laborieuses, bien que ces techniques impliquent un coût élevé.Ainsi, l'ISH dépend de la formation d'hybrides ADN-ADN ou ADN-ARN et l'IHC dépend des réactions spécifiques entre l'anticorps et l'antigène. C'est la différence entre l'hybridation in situ.

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Références:

1. Duraiyan, Jeyapradha et al. "Applications de l'immunohistochimie. "Journal of Pharmacy & Sciences Bioallied, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, août 2012, disponible ici. Consulté le 24 août 2017.

2. "Hybridation in situ (ISH). "Centre national d'information sur la biotechnologie, U. S. Bibliothèque nationale de médecine, disponible ici. Consulté le 24 août 2017.

Courtoisie d'image:

1. "FISH (Hybridation in situ fluorescente)" Par MrMatze - Propre travail (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia

2. "Immunohistochemicalstaining2" Par Imoen à la Wikipédia en langue anglaise (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia