Différence entre la nitrocellulose et le PVDF | Nitrocellulose vs PVDF

Différence clé - Nitrocellulose vs PVDF

Le transfert de Western est une méthode qui permet la détection et la quantification de protéines spécifiques à partir d'un échantillon de protéine. La fiabilité de la technique dépend de la sélection d'une membrane correcte pour l'absorption des protéines du gel. Il existe différents types de membranes microporeuses. Les membranes de nitrocellulose et de PVDF sont deux membranes préférées par les chercheurs en raison de leurs caractéristiques particulières par rapport aux autres types de membranes. La sélection entre la nitrocellulose ou le PVDF est également un autre défi dans le transfert de Western. La nitrocellulose et le PVDF ont une capacité d'absorption de protéines élevée. La différence essentielle entre la membrane de nitrocellulose et la membrane de PVDF est que les membranes de nitrocellulose n'ont pas la capacité de dépouiller les anticorps et de réutiliser la membrane pour la réprobation des anticorps tandis que les membranes de PVDF ont une capacité de récupération et de réutilisation .

TABLE DES MATIÈRES

1. Vue d'ensemble et différence clé

2. Qu'est-ce que la nitrocellulose

3. Qu'est-ce que PVDF

4. Comparaison côte à côte - Nitrocellulose vs PVDF

5. Résumé

Qu'est-ce que la nitrocellulose?

La nitrocellulose est un polymère fabriqué en traitant de la cellulose avec de l'acide nitrique et est utilisée pour fabriquer des membranes microporeuses en biologie moléculaire, en particulier pour les techniques de buvardage telles que le transfert de Southern, Northern et Western. Les tailles des pores des membranes de nitrocellulose vont de 3 à 20 μm. Les membranes microporeuses en nitrocellulose facilitent la détection des réactions immunochimiques se produisant à la surface de la membrane. Par conséquent, les membranes de nitrocellulose sont fréquemment utilisées pour l'immobilisation des protéines et la détection de protéines spécifiques dans le transfert de Western. Les membranes de nitrocellulose peuvent également immobiliser les glycoprotéines et les acides nucléiques.

Les membranes de nitrocellulose sont préférées dans les essais d'écoulement latéral en raison de plusieurs caractéristiques. Les membranes de nitrocellulose absorbent les protéines à haute concentration. Le solvant utilisé pour mouiller la membrane ne diminue pas l'absorption de la protéine membranaire de nitrocellulose. Les membranes de nitrocellulose peuvent être facilement découpées à la taille de gel souhaitée et transférer les protéines du gel à la membrane par transfert électrique ou capillaire. La nitrocellulose permet un écoulement plus rapide des protéines à travers la membrane avec un fort potentiel de liaison. La nitrocellulose montre une résistance améliorée de la manipulation. Un autre attribut spécial de la membrane en nitrocellulose est qu'il peut être facilement collé avec des adhésifs résistant à l'eau sans solvant sur divers supports en plastique.

-> Figure 9: Membrane de nitrocellulose pour le transfert de Western

Qu'est-ce que le PVDF?

Le difluorure de polyvinylidène (PVDF) est un fluoropolymère produit par la polymérisation du difluorure de vinylidène et possède une forte capacité d'immobilisation des protéines. Par conséquent, les membranes microporeuses fabriquées à partir de PVDF sont utilisées dans les techniques de transfert de Western pour analyser des protéines spécifiques à partir des mélanges de protéines. Les membranes PVDF peuvent également être utilisées pour l'analyse des acides aminés et le séquençage des protéines. La caractéristique la plus importante de la membrane de PVDF par rapport à la membrane de nitrocellulose est qu'elle peut être facilement éliminée des anticorps et réutilisée pour les sondes d'anticorps ultérieures.

Les membranes de PVDF sont plus épaisses que les membranes de nitrocellulose; par conséquent, plus résistant aux dommages lors de la réutilisation. Les membranes PVDF sont hautement hydrophobes. Par conséquent, ils doivent être trempés dans du méthanol ou de l'isopropanol avant utilisation.

Quelle est la différence entre la nitrocellulose et le PVDF?

- diff Article Milieu avant Tableau ->

Nitrocellulose vs PVDF

La nitrocellulose est un polymère composé de cellulose.
Le PVDF est un fluoropolymère produit par la polymérisation du difluorure de vinylidène.	Taille des pores de la membrane
Les tailles de pores typiques sont 0. 1, 0. 2 ou 0. 45μ
Les tailles de pores typiques sont 0. 1, 0. 2 ou 0. 45μm	Capacité de liaison des protéines La nitrocellulose a une capacité de liaison aux protéines de 80 à 100 μg / cm
2
. Le PVDF a une capacité de liaison aux protéines de 170 à 200 μg / cm 2	. Sensibilité Ceci a une faible sensibilité par rapport au PVDF.
Cela a une haute sensibilité.
Détection des protéines faiblement exprimées	La sensibilité étant faible dans les membranes de nitrocellulose, elle n'est pas adaptée à la détection de protéines faiblement exprimées.
Ceci est plus approprié pour la détection de protéines faiblement exprimées en raison de sa haute sensibilité.
Bruit de fond	Bruit de fond inférieur
Bruit de fond plus élevé.
Interactions avec les protéines	Les molécules de protéines se lient aux membranes de nitrocellulose par des interactions hydrophobes.
Les protéines se lient aux membranes PVDF par des interactions hydrophobes et dipolaires.
Nature de la membrane	La nitrocellulose est fragile et fragile. Cependant, des versions de nitrocellulose sont disponibles, et elles sont résistantes.
Le PVDF est plus durable et a une résistance chimique plus élevée.
Capacité à dénuder et à réutiliser	La nitrocellulose peut avoir du mal à se décaper et à réprobiner sans perdre le signal.
Le PVDF est idéal pour les applications de reprobage et de séquençage.
Pertinence	La nitrocellulose est idéale pour détecter les protéines de faible poids moléculaire.
Le PVDF convient mieux à la détection de protéines de plus haut poids moléculaire.
Autres utilisations	La nitrocellulose peut être utilisée pour l'analyse des acides nucléiques et le transfert de points / points.
Le PVDF peut être utilisé pour le séquençage des protéines et les systèmes d'analyse en phase solide.
Coût	C'est moins cher que les membranes en PVDF.
C'est plus cher que les membranes de nitrocellulose.
Besoin de prémouillage	Les membranes en nitrocellulose ne nécessitent pas de pré-trempage avec du méthanol
Les membranes en PVDF nécessitent un pré-trempage avec du méthanol.
Résumé - Les membranes de nitrocellulose ont été les premières membranes utilisées commercialement pour le dosage du flux latéral. Ils ont une grande capacité d'absorption des protéines. Par conséquent, les membranes de nitrocellulose sont utilisées dans le transfert de Western. Le PVDF est un autre type de membrane utilisé dans le transfert de Western et il a également une capacité d'absorption de protéines élevée. Les deux types sont utilisés dans le Western blot pour l'analyse des protéines. Cependant, les membranes de PVDF ont des attributs plus spéciaux, ce qui les rend plus appropriées que les membranes de nitrocellulose pour le transfert de Western. Mais, les membranes de nitrocellulose conviennent mieux à la détection de protéines de faible poids moléculaire, les membranes de PVDF conviennent mieux à la détection de protéines à poids moléculaire élevé. C'est la différence entre les membranes de nitrocellulose et de PVDF.	Courtoisie d'image:

1. "Western blot transfer" Par Bensaccount sur Wikipedia anglais (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia

Référence:

1. Luque-Garcia, José L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun et Thomas A. Neubert. "Utilisation de membranes de nitrocellulose pour la caractérisation de protéines par spectrométrie de masse à désorption laser / ionisation assistée par matrice. " Chimie analytique. U. S. Bibliothèque nationale de médecine, 15 juillet 2006. Web. 28 mars 2017

2. "Marqueurs moléculaires et biotechnologie végétale. " Livres Google. N. p., n. ré. Web. 28 mars 2017

3. Lundi 8 avril 2013 Tweet. "La magie dans la membrane: Choisissez judicieusement pour les meilleurs résultats Western Blot. "Biocompare. N. p., 08 avr. 2013. Web. 28 mars 2017