Différence entre électrophorèse sur gel et SDS Page | Gel Electrophoresis vs SDS Page

Anonim

Différence clé - Electrophorèse sur gel vs SDS Page

L'électrophorèse sur gel est une technique qui sépare les macromolécules dans un champ électrique. C'est une méthode courante en biologie moléculaire pour séparer l'ADN, l'ARN et les protéines des mélanges en fonction de leurs tailles moléculaires. SDS Page est un type d'électrophorèse sur gel qui est utilisé pour séparer les protéines d'un mélange de protéines en fonction de leur taille. L'électrophorèse sur gel est un terme utilisé pour désigner la technique normale appliquée pour la séparation de l'ADN, de l'ARN et des protéines , tandis que SDS Page est un type d'électrophorèse sur gel. Ceci est la différence clé entre l'électrophorèse sur gel et SDS Page.

TABLE DES MATIÈRES

1. Vue d'ensemble et différence clé

2. Qu'est-ce que l'électrophorèse sur gel

3. Qu'est-ce que SDS Page

4. Comparaison côte à côte - Électrophorèse sur gel vs SDS Page

5. Résumé

Qu'est-ce que l'électrophorèse sur gel?

L'électrophorèse sur gel est une technique couramment utilisée dans les laboratoires pour séparer les molécules chargées telles que l'ADN, l'ARN, les protéines, etc. de leurs mélanges. Un gel est utilisé dans l'électrophorèse sur gel. Il agit comme un tamis moléculaire. Il existe deux types de gels utilisés dans l'électrophorèse sur gel, à savoir l'agarose et le polyacrylamide. La sélection d'un gel et d'une préparation de gel sont des facteurs importants à prendre en considération dans les électrophorèses sur gel car la taille des pores du gel doit être manipulée avec précaution pour une bonne séparation des molécules par électrophorèse sur gel. L'électrophorèse sur gel a un champ électrique connecté aux deux extrémités du gel. Une extrémité du gel montre une charge positive tandis que l'autre extrémité est chargée négativement.

L'ADN et l'ARN sont des molécules chargées négativement. Une fois qu'ils sont chargés dans le gel à partir de l'extrémité négative du gel et appliqués au champ électrique, ils migrent à travers les pores du gel vers l'extrémité chargée positivement du gel. La vitesse de la migration dépend de la charge et de la taille de la molécule. Les petites molécules migrent facilement à travers les pores du gel que les molécules plus grosses. Par conséquent, de plus petites molécules parcourent une longue distance à travers le gel et les plus grosses molécules parcourent une courte distance. Pour observer le déplacement des molécules sur le gel, des types spéciaux de colorants sont utilisés. Le champ électrique est appliqué pendant une certaine période de temps et arrêté pour empêcher la perte de molécules et pour maintenir les molécules à leurs positions parcourues. Différentes bandes peuvent être observées dans le gel.Ces bandes représentent les molécules de différentes tailles. Par conséquent, l'électrophorèse sur gel est utile pour différencier les molécules en fonction de leur taille.

L'électrophorèse sur gel est incorporée dans diverses techniques en tant que technique de préparation en biologie moléculaire telle que la PCR, la RFLP, le clonage, le séquençage de l'ADN, le transfert de Southern, la cartographie du génome, etc.

Figure 01: gel d'agarose électrophorèse

Qu'est-ce que la page SDS?

L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide de dodécylsulfate de sodium

(SDS Page) est un type d'électrophorèse sur gel utilisé pour séparer les protéines. Lorsque l'électrophorèse sur gel est utilisée pour séparer les protéines, des traitements spéciaux sont nécessaires car les protéines ne sont pas chargées négativement comme l'ADN et l'ARN et ne migrent pas vers la fin positive ou la fin négative. Par conséquent, les protéines sont dénaturées et revêtues d'une charge négative avant l'électrophorèse sur gel. Il est fait en utilisant un détergent appelé sodium dodecyl sulfate (SDS). L'électrophorèse sur gel qui utilise le SDS et un gel de polyacrylamide pour le support est connue sous le nom de SDS Page. Cette technique est couramment utilisée en biochimie, en génétique, en médecine légale et en biologie moléculaire. Au cours de la page SDS, les protéines sont mélangées avec du SDS. SDS déplie les protéines dans une forme linéaire et les recouvre avec une charge négative proportionnelle à leur masse moléculaire. En raison de la charge négative, les molécules de protéine migrent vers l'extrémité de charge positive du gel et se séparent en fonction de leurs masses moléculaires. Dans SDS Page, le polyacrylamide est utilisé comme support solide pour le gel. La séparation réelle des protéines dépend principalement des propriétés du gel. Par conséquent, la préparation de gel de polyacrylamide doit être effectuée avec soin et des concentrations correctes de polyacrylamide doivent être utilisées. Les gels de Polyacrylamide présentent une haute résolution que les gels d'agarose. Par conséquent, la page SDS est considérée comme une technique à haute résolution pour la séparation des protéines.

SDS Page est un type d'électrophorèse sur gel dénaturant. Il a une limitation majeure dans l'analyse des protéines. Puisque la SDS dénature les protéines avant la séparation, elle ne permet pas la détection de l'activité enzymatique, des interactions de liaison aux protéines, des cofacteurs protéiques, etc.

Figure 02: page SDS

Quelle est la différence entre l'électrophorèse sur gel et la page SDS?

- diff Article Milieu avant Table ->

Gel Electrophoresis vs SDS Page

L'électrophorèse sur gel est une méthode réalisée pour séparer les macromolécules en utilisant un champ électrique.

SDS Page est une technique d'électrophorèse en gel à haute résolution utilisée pour séparer les protéines en fonction de leur masse. Gel Run
Il peut être effectué de manière horizontale ou verticale.
La page SDS s'exécute toujours verticalement. Base de séparation
La séparation se fait en fonction de la charge et de la taille.
La séparation des protéines se fait en fonction de la masse et de la charge. Résolution
L'électrophorèse sur gel d'agarose a une faible résolution et l'électrophorèse sur gel de Polyacrylamide a une résolution plus élevée
La page SDS a une meilleure résolution. Dénaturation
L'électrophorèse sur gel comprend à la fois des techniques dénaturantes et non dénaturantes.
SDS Page dénature les protéines avant la séparation. Résumé - L'électrophorèse sur gel vs SDS Page

L'électrophorèse sur gel est une technique courante utilisée pour la séparation et l'analyse de l'ADN, de l'ARN et des protéines en fonction de leur taille et de leur charge. Il existe deux types principaux d'électrophorèse sur gel, à savoir l'électrophorèse sur gel d'agarose et l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Les gels d'agarose sont principalement utilisés pour la séparation des acides nucléiques; lorsqu'une résolution plus élevée est requise, des gels de Polyacrylamide sont utilisés. SDS Page est un type d'électrophorèse sur gel couramment utilisé pour séparer les mélanges complexes de protéines. Il est considéré comme une technique de séparation des protéines à haute résolution. C'est la différence entre l'électrophorèse sur gel et SDS Page.

Références:

1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig et David H. Petering. "SDS-PAGE native: Séparation électrophorétique à haute résolution de protéines avec rétention de propriétés natives, y compris les ions métalliques liés. www. ncbi. nlm. nih. gouv. N. p., Mai 2014. Web. 7 avril 2017

2. Stellwagen, Nancy C. "Electrophorèse de l'ADN dans les gels d'agarose, gels de Polyacrylamide et en solution libre. "Electrophorèse. U. S. Bibliothèque nationale de médecine, juin 2009. Web. 07 avr. 2017

Courtoisie d'image:

1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia

2. «Electrophorèse sur gel d'ADN-agarose» Par l'École des ressources naturelles d'Ann Arbor - Laboratoire d'ADN (CC BY 2. 0) via Commons Wikimedia