Différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur | Selectable Marker vs Reporter Gene

Différence clé - marqueur sélectionnable vs gène rapporteur

La technique de génie génétique est utilisée pour transférer des gènes importants d'un organisme à un autre organisme. L'insertion d'un gène étranger dans le génome d'un autre organisme et son expression dans la cellule hôte sont les étapes les plus difficiles du transfert de gène. Pour détecter le succès du processus de transformation, un marqueur sélectionnable et un gène rapporteur sont utilisés dans la molécule recombinante. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN ou un gène qui exprime et sélectionne les cellules transformées à partir des cellules non transformées. Un gène rapporteur est un autre gène qui est utilisé pour distinguer les cellules transformées et pour quantifier ou détecter comment le gène inséré fonctionne dans l'hôte. La différence clé entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur est que le marqueur sélectionnable est utilisé pour cribler les cellules non transformées et pour signaler les cellules transformées tandis que le gène rapporteur est utilisé pour quantifier le niveau d'expression des gènes dans l'hôte.

TABLE DES MATIÈRES

1. Vue d'ensemble et différence clé

2. Qu'est-ce que le marqueur sélectionnable

3. Qu'est-ce que Reporter Gene

4. Comparaison côte à côte - marqueur sélectionnable vs gène rapporteur

5. Résumé

Qu'est-ce qu'un marqueur sélectionnable?

Dans le génie génétique, le gène d'intérêt est inséré dans un vecteur approprié et transformé en organismes hôtes. Cependant, la transformation ne réussit que dans les cellules hôtes compétentes et il est possible que les cellules hôtes rejettent l'absorption d'ADN étranger. Par conséquent, la différenciation des cellules transformées et non transformées est importante pour poursuivre l'expérimentation. Par conséquent, les chercheurs incorporent un gène marqueur sélectionnable au vecteur pour une sélection facile des cellules transformées à partir de cellules non transformées. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN, en particulier un gène utile dans l'identification des cellules transformées. Ce gène marqueur présente un trait qui convient à une sélection artificielle de cellules transformées à partir de cellules non transformées sur un milieu.

Les marqueurs sélectionnables les plus courants utilisés en biologie moléculaire sont les gènes résistants aux antibiotiques. Un gène de résistance aux antibiotiques est inséré dans le vecteur et transformé dans des cellules hôtes en particulier vers la bactérie hôte. Cet antibiotique particulier est incorporé dans le milieu de croissance de la bactérie. En raison de la présence du marqueur sélectif, dans les conditions sélectives, seules les cellules qui contiennent le marqueur sélectionnable approprié peuvent survivre.Les cellules non transformées sont incapables de se développer dans le milieu contenant des antibiotiques. Par conséquent, en raison du marqueur sélectionnable qui est résistant aux antibiotiques, les cellules transformées sont facilement identifiées.

Les gènes qui confèrent des traits pour les antimétabolites, les herbicides sont utilisés comme marqueurs sélectifs dans les vecteurs de clonage dans le génie génétique des plantes. Cependant, cette cotransformation de marqueurs sélectifs en organismes génétiquement modifiés a des effets négatifs sur l'environnement et l'homme. La libération de bactéries résistantes aux antibiotiques peut augmenter la résistivité aux antibiotiques des pathogènes humains. Il peut contaminer le produit ou la biomasse par des antibiotiques et peut perdre la pression sélective résultant de la dégradation et de l'inactivation des antibiotiques.

Figure 01: Vecteur plasmidique pour le transfert de gènes avec un marqueur sélectionnable

Qu'est-ce qu'un gène rapporteur?

Les gènes reporteurs sont des gènes qui permettent la détection ou la mesure de l'expression du gène inséré. Ces gènes rapporteurs peuvent être attachés à des séquences régulatrices du gène d'intérêt pour signaler le ou les lieux d'expression. Par conséquent, lors de l'expression de gènes sous le même promoteur, ils sont transcrits en une seule séquence d'ARNm et ensuite traduits en une protéine qui peut indiquer le niveau d'expression des gènes.

Les gènes reporteurs sont de divers types et ils contiennent des caractéristiques visuellement identifiables qui sont généralement impliquées dans les protéines fluorescentes et luminescentes. Les gènes qui codent les protéines fluorescentes et les enzymes convertissent les substrats invisibles en produits luminescents ou colorés en signalant l'expression réussie du gène et en donnant l'opportunité de quantifier l'expression du gène.

Figure 02: Expression du gène rapporteur

Quelle est la différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur?

- diff Article Milieu avant Tableau ->

Marqueur sélectionnable vs gène rapporteur
Le marqueur sélectionnable est une sorte de séquence d'ADN qui aide à distinguer les cellules transformées des cellules non transformées.	Le gène rapporteur est un gène qui aide à quantifier l'expression du gène désiré inséré dans la cellule hôte.
Nature des unités produites
Les gènes sont codés avec des caractéristiques qui aident à la sélection artificielle sur des milieux de culture.	Les gènes sont codés avec des caractéristiques visuellement identifiables.
Utilisation
Les gènes de résistance aux antibiotiques, les gènes antimétabolites, les gènes de résistance aux herbicides, etc. sont des exemples de marqueurs sélectionnables.	Les gènes codant pour la protéine fluorescente verte, la β-glucuronidase, la chloramphénicol acétyltransférase, la protéine fluorescente rouge, etc. sont des exemples.

Résumé - Les marqueurs sélectionnables permettent aux cellules transformées de croître dans des milieux sélectifs dosés avec un antibiotique ou un herbicide particulier. Ils sont utilisés pour la sélection précoce des cellules transformées. Les gènes reporteurs sont utilisés pour quantifier le niveau d'expression du gène désiré inséré. Ils permettent également la différenciation des cellules transformées et non transformées. C'est la différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur.Le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur sont considérés comme des marqueurs importants dans le génie génétique.

Références:

1. Ziemienowicz, Alicja. "Les marqueurs sélectionnables de plantes et les gènes rapporteurs. "SpringerLink. Springer-Verlag, n. ré. Web. 23 mars 2017.

2. Shih, Chen-Han, Hsiao-Yin Chen, Hung-Chieh Lee et Huai-Jen Tsai. "Le gène de la chromoprotéine pourpre sert de nouveau marqueur de sélection pour la transgénèse de la microalgue Nannochloropsis oculata. "PLOS ONE. Bibliothèque publique des sciences, n. ré. Web. 25 mars 2017

Courtoisie d'image:

1. "Plasmide avec insert" Par Michael Jeltsch - Propre travail (CC BY-SA 4. 0) via Commons Wikimedia

2. "Gène Reporter" Par TransControl à fr. wikipedia (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia